बाँझ कोठा मानकीकरण प्रक्रिया र स्वीकृति विशिष्टताहरू

1. उद्देश्य: यो प्रक्रियाले एसेप्टिक सञ्चालन र बाँझ कोठाहरूको सुरक्षाको लागि एक मानकीकृत प्रक्रिया प्रदान गर्ने लक्ष्य राख्छ।

2. आवेदनको दायरा: जैविक परीक्षण प्रयोगशाला

3. जिम्मेवार व्यक्ति: QC सुपरवाइजर परीक्षक

4. परिभाषा: कुनै पनि छैन

5. सुरक्षा सावधानीहरू

माइक्रोबियल दूषित हुनबाट बच्न कडाईका साथ एसेप्टिक अपरेशनहरू गर्नुहोस्; अपरेटरहरूले बाँझ कोठामा प्रवेश गर्नु अघि UV बत्ती बन्द गर्नुपर्छ।

6. प्रक्रियाहरू

६.१। जीवाणुरहित कोठामा बाँझ अपरेशन कोठा र बफर कोठा हुनुपर्छ। बाँझ अपरेशन कोठाको सरसफाई कक्षा १०००० सम्म पुग्नुपर्छ। भित्री तापक्रम २०-२४ डिग्री सेल्सियस र आर्द्रता ४५-६०% मा कायम राख्नुपर्छ। सफा बेन्चको सरसफाई कक्षा १०० सम्म पुग्नुपर्छ।

६.२। जीवाणुरहित कोठा सफा राख्नुपर्छ, र प्रदूषण रोक्नको लागि फोहोर थुपार्न कडाइका साथ निषेध गरिएको छ।

६.३। सबै नसबंदी उपकरण र कल्चर मिडियाको प्रदूषणलाई कडाईका साथ रोक्नुहोस्। जो प्रदूषित छन् तिनीहरूलाई प्रयोग गर्न बन्द गर्नुपर्छ।

६.४। जीवाणुरहित कोठामा ५% क्रेसोल घोल, ७०% अल्कोहल, ०.१% क्लोरमेथियोनिन घोल आदि जस्ता काम गर्ने एकाग्रता कीटाणुनाशक पदार्थहरू भएको हुनुपर्छ।

६.५ बाँझ कोठाको सरसफाईले आवश्यकताहरू पूरा गरेको छ भनी सुनिश्चित गर्नको लागि बाँझ कोठालाई नियमित रूपमा बाँझ र उपयुक्त कीटाणुनाशकसँग सफा गरिनुपर्छ।

६.६। सबै उपकरणहरू, उपकरणहरू, भाँडाहरू र अन्य वस्तुहरू जुन बाँझरहित कोठामा ल्याइनु पर्छ, उपयुक्त विधिहरूद्वारा कडा रूपमा बेर्नु पर्छ र जीवाणुरहित गर्नुपर्छ।

६.७। बाँझ कोठामा प्रवेश गर्नु अघि, कर्मचारीहरूले आफ्नो हात साबुन वा कीटाणुनाशकले धुनुपर्छ, र त्यसपछि बफर कोठामा विशेष कार्य कपडा, जुत्ता, टोपी, मास्क र पन्जामा परिवर्तन गर्नुपर्छ (वा 70% इथानोलले आफ्नो हात पुन: सफा गर्नुहोस्) बाँझ कोठामा प्रवेश गर्नु अघि। ब्याक्टेरियल च्याम्बरमा सञ्चालन गर्नुहोस्।

६.८। बाँझ कोठा प्रयोग गर्नु अघि, बाँझ कोठामा पराबैंगनी बत्तीलाई विकिरण र नसबंदीको लागि 30 मिनेट भन्दा बढीको लागि खोल्नु पर्छ, र सफा बेन्च एकै समयमा हावा उड्नको लागि खोल्नु पर्छ। अपरेशन पूरा भएपछि, बाँझ कोठालाई समयमै सफा गर्नुपर्छ र त्यसपछि पराबैंगनी किरणले २० मिनेटसम्म बाँझ राख्नु पर्छ।

६.९। निरीक्षण गर्नु अघि, परीक्षण नमूनाको बाहिरी प्याकेजिङलाई अक्षुण्ण राख्नु पर्छ र प्रदूषण रोक्नको लागि खोल्नु हुँदैन। निरीक्षण गर्नु अघि, बाहिरी सतहलाई कीटाणुरहित गर्न 70% अल्कोहल कपास बलहरू प्रयोग गर्नुहोस्।

६.१० प्रत्येक अपरेशनको समयमा, एसेप्टिक सञ्चालनको विश्वसनीयता जाँच गर्न नकारात्मक नियन्त्रण गर्नुपर्छ।

६.११। ब्याक्टेरियल तरल पदार्थलाई अवशोषित गर्दा, तपाईंले यसलाई अवशोषित गर्न सक्शन बल प्रयोग गर्नुपर्छ। आफ्नो मुखले सीधै पराललाई नछुनुहोस्।

६.१२। इनोकुलेशन सुईलाई प्रत्येक प्रयोग गर्नु अघि र पछि ज्वालाद्वारा बाँझ राख्नु पर्छ। चिसो पछि, संस्कृति टीकाकरण गर्न सकिन्छ।

६.१३। स्ट्र, टेस्ट ट्युब, पेट्री डिश र ब्याक्टेरियल तरल पदार्थ भएका अन्य भाँडाहरूलाई कीटाणुशोधनका लागि ५% लाइसोल घोल भएको स्टेरिलाइजेशन बाल्टीमा भिजाएर २४ घण्टापछि बाहिर निकालेर कुल्ला गर्नुपर्छ।

६.१४। यदि टेबल वा भुइँमा ब्याक्टेरियल तरल पदार्थ छिरेको छ भने, तपाईंले तुरुन्तै 5% कार्बोलिक एसिड घोल वा 3% लाइसोल दूषित ठाउँमा कम्तिमा 30 मिनेटको लागि खन्याउनुपर्छ। जब काम गर्ने लुगा र टोपीहरू ब्याक्टेरियाको तरल पदार्थले दूषित हुन्छन्, तिनीहरूलाई तुरुन्तै निकाल्नुपर्छ र उच्च-दबाव स्टीम नसबंदी पछि धुनुपर्छ।

६.१५। जीवित ब्याक्टेरिया भएका सबै वस्तुहरूलाई ट्यापमुनि कुल्ला गर्नु अघि कीटाणुरहित हुनुपर्छ। ढल प्रदूषित गर्न कडा रूपमा निषेध गरिएको छ।

६.१६। बाँझ कोठामा कोलोनीहरूको संख्या मासिक रूपमा जाँच गर्नुपर्छ। सफा बेन्च खोल्दा, 90 एमएमको भित्री व्यास भएका धेरै बाँझरहित पेट्री डिशहरू लिनुहोस्, र लगभग 45 डिग्री सेल्सियसमा पग्लिएको र चिसो भएको लगभग 15 मिलीलीटर पौष्टिक अगर कल्चर माध्यमलाई एसेप्टिक रूपमा इन्जेक्सन गर्नुहोस्। दृढता पछि, यसलाई 30 देखि 35 मा उल्टो ℃ इन्क्यूबेटरमा 48 घण्टाको लागि इन्क्युबेटमा राख्नुहोस्। बाँझोपन प्रमाणित गरेपछि, 3 देखि 5 प्लेटहरू लिनुहोस् र तिनीहरूलाई काम गर्ने स्थितिको बायाँ, बीच र दायाँमा राख्नुहोस्। कभर खोलेर 30 मिनेटको लागि खुला गरेपछि, तिनीहरूलाई 30 देखि 35 डिग्री सेल्सियस इन्क्यूबेटरमा 48 घण्टाको लागि उल्टो राख्नुहोस् र तिनीहरूलाई बाहिर निकाल्नुहोस्। जाँच गर्नुहोस्। वर्ग 100 सफा क्षेत्रमा प्लेटमा विविध ब्याक्टेरियाको औसत संख्या 1 कोलोनी भन्दा बढी हुँदैन, र कक्षा 10000 सफा कोठामा औसत संख्या 3 उपनिवेशहरू भन्दा बढी हुँदैन। यदि सीमा नाघ्यो भने, बारम्बार निरीक्षणले आवश्यकताहरू पूरा नगरेसम्म बाँझरहित कोठालाई राम्ररी कीटाणुरहित गर्नुपर्छ।

७. "ड्रग हाइजिनिक इन्स्पेक्शन मेथड्स" र "चाइना स्ट्यान्डर्ड अपरेटिङ प्रैक्टिसेस फर ड्रग इन्स्पेक्शन" को अध्याय (स्टेरिलिटी इन्स्पेक्शन मेथड) हेर्नुहोस्।

8. वितरण विभाग: गुणस्तर व्यवस्थापन विभाग

सफा कोठा प्राविधिक निर्देशन:

बाँझ वातावरण र बाँझ पदार्थहरू प्राप्त गरेपछि, हामीले एक विशिष्ट ज्ञात सूक्ष्मजीव अध्ययन गर्न वा तिनीहरूको कार्यहरू प्रयोग गर्न बाँझ अवस्था कायम गर्नुपर्छ। अन्यथा, बाहिरबाट विभिन्न सूक्ष्मजीवहरू सजिलैसँग मिसिन सक्छन्। बाहिरबाट अप्रासंगिक सूक्ष्मजीवहरू मिसिने घटनालाई माइक्रोबायोलोजीमा दूषित ब्याक्टेरिया भनिन्छ। प्रदूषण रोक्न माइक्रोबायोलोजिकल कार्यमा एक महत्वपूर्ण प्रविधि हो। एकातिर पूर्ण नसबंदी र अर्कोतिर प्रदुषणको रोकथाम एसेप्टिक प्रविधिका दुई पक्ष हुन्। थप रूपमा, हामीले अध्ययन अन्तर्गत सूक्ष्मजीवहरू, विशेष गरी रोगजनक सूक्ष्मजीवहरू वा प्रकृतिमा अवस्थित आनुवंशिक रूपमा इन्जिनियर गरिएका सूक्ष्मजीवहरूलाई हाम्रो प्रयोगात्मक कन्टेनरहरूबाट बाहिरी वातावरणमा भाग्नबाट रोक्नु पर्छ। यी उद्देश्यका लागि, माइक्रोबायोलोजीमा, त्यहाँ धेरै उपायहरू छन्।

जीवाणुरहित कोठा सामान्यतया सूक्ष्मजीवविज्ञान प्रयोगशालामा विशेष रूपमा सेट गरिएको सानो कोठा हो। पाना र गिलास संग निर्माण गर्न सकिन्छ। क्षेत्र धेरै ठूलो हुनु हुँदैन, लगभग 4-5 वर्ग मीटर, र उचाइ लगभग 2.5 मिटर हुनुपर्छ। बाँझ कोठा बाहिर बफर कोठा स्थापना गर्नुपर्छ। बफर कोठाको ढोका र बाँझ कोठाको ढोका एउटै दिशामा हुनुहुँदैन ताकि हावाको प्रवाहलाई विविध ब्याक्टेरियाहरू ल्याउनबाट रोक्न सकिन्छ। बाँझरहित कोठा र बफर कोठा दुवै हावा बन्द हुनुपर्छ। भित्री भेन्टिलेसन उपकरणहरूमा हावा निस्पंदन उपकरणहरू हुनुपर्छ। जीवाणुरहित कोठाको भुइँ र भित्ताहरू चिल्लो, फोहोर राख्न गाह्रो र सफा गर्न सजिलो हुनुपर्छ। काम सतह स्तर हुनुपर्छ। दुबै बाँझ कोठा र बफर कोठा पराबैंगनी बत्ती संग सुसज्जित छन्। बाँझ कोठामा पराबैंगनी बत्तीहरू कार्य सतहबाट १ मिटर टाढा छन्। जीवाणुरहित कोठामा प्रवेश गर्ने कर्मचारीले निर्जंतुक कपडा र टोपी लगाउनु पर्छ।

हाल, जीवाणुरहित कोठाहरू प्रायः माइक्रोबायोलोजी कारखानाहरूमा अवस्थित छन्, जबकि सामान्य प्रयोगशालाहरूले सफा बेन्च प्रयोग गर्छन्। सफा बेन्चको मुख्य कार्य भनेको कामको सतहमा रहेका सूक्ष्मजीवहरू सहित विभिन्न साना धुलोहरू हटाउन लामिनार वायु प्रवाह यन्त्र प्रयोग गर्नु हो। विद्युतीय उपकरणले हावालाई हेपा फिल्टरबाट पार गर्न र त्यसपछि कामको सतहमा प्रवेश गर्न अनुमति दिन्छ, जसले गर्दा कामको सतह सधैं बग्ने बाँझ हावाको नियन्त्रणमा रहन्छ। यसबाहेक, बाहिरी ब्याक्टेरियाको हावा भित्र पस्नबाट रोक्नको लागि बाहिरको छेउमा एक उच्च-गति एयर पर्दा छ।

कठिन परिस्थिति भएका ठाउँहरूमा, सफा बेन्चको सट्टा काठको बाँझ बक्सहरू पनि प्रयोग गर्न सकिन्छ। बाँझ बाकस एक साधारण संरचना छ र सार्न सजिलो छ। त्यहाँ बक्सको अगाडि दुईवटा प्वालहरू छन्, जुन सञ्चालनमा नभएको बेला पुश-पुल ढोकाहरूद्वारा अवरुद्ध हुन्छन्। तपाईं अपरेशनको समयमा आफ्नो हात विस्तार गर्न सक्नुहुन्छ। अगाडिको माथिल्लो भाग आन्तरिक सञ्चालनको सुविधाको लागि गिलासले सुसज्जित छ। बक्स भित्र एक पराबैंगनी बत्ती छ, र भाँडा र ब्याक्टेरिया छेउमा सानो ढोकाबाट भित्र राख्न सकिन्छ।

एसेप्टिक अपरेटिङ प्रविधिहरू हाल माइक्रोबायोलोजिकल अनुसन्धान र अनुप्रयोगहरूमा महत्त्वपूर्ण भूमिका खेल्दैनन्, तर धेरै जैव प्रविधिहरूमा पनि व्यापक रूपमा प्रयोग गरिन्छ। उदाहरणका लागि, ट्रान्सजेनिक प्रविधि, मोनोक्लोनल एन्टिबडी प्रविधि, आदि।